簡要描述:
THP-1懸浮細(xì)胞高效轉(zhuǎn)染試劑可轉(zhuǎn)染極度難轉(zhuǎn)染的免疫細(xì)胞、懸浮細(xì)胞,如:T細(xì)胞、NK細(xì)胞、人淋巴細(xì)胞、THP-1等。
THP-1懸浮細(xì)胞高效轉(zhuǎn)染試劑
一、產(chǎn)品說明:
1、產(chǎn)品名稱
Advanced DNA RNA Transfection Reagent
2、包裝規(guī)格
貨號(hào):AD600150
規(guī)格:1.5ml
3、儲(chǔ)存條件
常溫運(yùn)輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復(fù)凍融。
二、THP-1懸浮細(xì)胞高效轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng):
1、質(zhì)粒 DNA 必須溶解于無菌雙蒸水或超純水,但不能溶解于提取試劑盒提供的 Buffer。溶解于 Buffer 的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率會(huì)下降 80%左右,甚至?xí)D(zhuǎn)染失敗。
2、質(zhì)粒必須去除內(nèi)毒素,內(nèi)毒素對細(xì)胞將產(chǎn)生很大的細(xì)胞毒性,會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率下降 70%-80%左 右,甚至導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失?。ㄍ扑]使用 Qiagen、TIANGEN、Omega 去內(nèi)毒素質(zhì)粒提取試劑盒)。
3、復(fù)合物的制備過程中是絕對不能用其他任何試劑對核酸或轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行稀釋,只需將核酸和轉(zhuǎn)染 試劑兩者按 1:1 比例直接混合,如果進(jìn)行了稀釋會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失。
4、轉(zhuǎn)染試劑與核酸混勻后用移液器吹打 10-15 次,室溫孵育 10-15 分鐘后即可加入細(xì)胞培養(yǎng)板。
5、轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后進(jìn)行正常換液,不能像 Lipo2000 一樣轉(zhuǎn)染 4-6 小時(shí)后換液。
6、原代細(xì)胞、免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染時(shí),細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基里面不能含有雙抗培養(yǎng)基。
三、(阝擊)軍軍醫(yī)大學(xué)余博士提供的轉(zhuǎn)染效果圖
Zeta Life介紹:
美國 Zeta Life 公司成立美國 Zeta Life 于 1989 年,是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基 DMEM/F12 主要完成人,有三十多年的胎牛血清、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、以及干細(xì)胞、免疫細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞等多種不同類型哺乳動(dòng)物細(xì)胞的無血清培養(yǎng)液生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn);也是目前世界胎牛血清、無血清培養(yǎng)基最大的 OEM 供應(yīng)商之一;每批血清均有完整的血源證明文件、獸醫(yī)師檢驗(yàn)證明及品質(zhì)測試報(bào)告;ZETA LIFE 血清在 100 級(jí)的無菌間采用全自動(dòng)方式制造生產(chǎn),具有良好的可再現(xiàn)性及可追溯性。 2018 年 Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑,此技術(shù)成為新的蛋白功能、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。
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