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淺談內(nèi)毒素對細胞培養(yǎng)的影響

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內(nèi)毒素對細胞培養(yǎng)的影響

在細胞培養(yǎng)的精密世界中，一個微小的污染都可能dian覆整個實驗的進程。今天，我們要聚焦的正是這個不容忽視的隱形威脅——內(nèi)毒素。

BioProE是我公司自產(chǎn)的DPBS，低內(nèi)毒素，對細胞的傷害降到zui低！

內(nèi)毒素：細胞培養(yǎng)的“隱形刺客"

內(nèi)毒素，這個聽起來有些陌生的名詞，實際上在細胞培養(yǎng)中扮演著不容忽視的角色。它是革蘭氏陰性菌細胞壁的一種成分，當細菌死亡或細胞壁破裂后，內(nèi)毒素就會被釋放出來。這些微小的分子，雖然肉眼不可見，但卻能對細胞產(chǎn)生巨大的影響。

在細胞培養(yǎng)過程中，內(nèi)毒素的污染可能導致細胞生長緩慢、細胞毒性增加，甚至影響瞬時轉(zhuǎn)染的效率。想象一下，您精心設計的實驗，因為內(nèi)毒素的污染而功虧一簣，是不是非常令人沮喪？對于追求精準與高效的現(xiàn)代生物研究而言，內(nèi)毒素控制成為了不可回避的挑戰(zhàn)。

圖1 內(nèi)毒素分子結(jié)構(gòu)

內(nèi)毒素對細胞培養(yǎng)的影響

1. 免疫和炎癥反應： 內(nèi)毒素可以激活細胞的免疫反應，導致炎癥因子的釋放，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β）等。這些炎癥因子可以影響細胞的生理功能，導致細胞內(nèi)信號通路的紊亂，甚至可能引發(fā)細胞凋亡。

2. 細胞生長和代謝的影響： 高水平的內(nèi)毒素暴露可能影響細胞的生長和代謝。細胞在免疫激活狀態(tài)下可能會減緩生長，因為它們需要將資源用于炎癥反應。此外，內(nèi)毒素可能干擾細胞的代謝途徑，影響蛋白質(zhì)合成、DNA合成等。

3. 實驗結(jié)果的“ding時zhadan"：內(nèi)毒素的存在使實驗結(jié)果變得不穩(wěn)定，可靠性大打折扣。

4. 影響細胞因子和蛋白質(zhì)的表達：內(nèi)毒素的存在可能導致細胞產(chǎn)生炎癥相關(guān)的細胞因子和蛋白質(zhì)的表達增加。這可能對特定的研究課題產(chǎn)生影響，如細胞信號通路、蛋白質(zhì)相互作用等的研究。

內(nèi)毒素對瞬時轉(zhuǎn)染的影響

內(nèi)毒素的存在會極大程度地影響轉(zhuǎn)染效率。由于內(nèi)毒素的兩親性和負電荷性，性質(zhì)類似于DNA，因此在質(zhì)粒純化中會伴隨質(zhì)粒一同被純化出來。這些內(nèi)毒素在轉(zhuǎn)染過程中可能與轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒形成不穩(wěn)定的復合物，從而降低質(zhì)粒與細胞的結(jié)合效率和轉(zhuǎn)染效率。

具體來說，高純度的質(zhì)粒、低類毒素細胞生長環(huán)境是獲得高轉(zhuǎn)染效率的必要條件，內(nèi)毒素含量越低，轉(zhuǎn)染效率也相應提高。特別是在使用陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑時，內(nèi)毒素的影響更為顯著，所以確保細胞培養(yǎng)液中低類毒素含量是非常重要的。

1. 轉(zhuǎn)染效率降低：干擾轉(zhuǎn)染復合物進入細胞或影響其在細胞內(nèi)的作用，導致成功轉(zhuǎn)染的細胞比例下降。

2. 基因表達異常：使轉(zhuǎn)入基因的表達水平不穩(wěn)定或降低，影響實驗結(jié)果的準確性和可重復性。 
3. 細胞應激反應：引發(fā)細胞一系列應激相關(guān)的信號通路變化，進而間接影響轉(zhuǎn)染過程和后續(xù)的基因表達。

如何降低細胞培養(yǎng)中的內(nèi)毒素含量？

1.所有實驗室器皿、培養(yǎng)基原料、以及適當?shù)膶嶒炇壹夹g(shù)的che底清潔，對于大幅降低細胞培養(yǎng)實驗室中的內(nèi)毒素水平至關(guān)重要。

2.使用來自可靠試劑供應商提供的經(jīng)內(nèi)毒素測試的試劑、補劑和培養(yǎng)基

總之，內(nèi)毒素對細胞培養(yǎng)有負面影響，需要合理選擇試劑，并嚴格控制培養(yǎng)條件，以降低內(nèi)毒素對細胞的不良影響。選擇合適的產(chǎn)品，可以讓你的細胞培養(yǎng)實驗更省心，尤其是難養(yǎng)的免疫細胞，干細胞等，更需要使用超低內(nèi)毒素PBS、RPMI1640、DMEM、DMEM/F12等進行培養(yǎng)。